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点击数:284次    2022-10-20 00:12
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在试管婴儿治疗期间吃白藜芦醇对卵子的质量和数量会产生有利的影响。生育能力会随着年龄下降,白藜芦醇有保存生育能力的作用,能够保护未成熟卵细胞或卵母细胞的活性,白藜芦醇是一种优秀的抗氧化剂,可以通过激活抗衰老基因,实现保护线粒体功能的作用,还可以防止自由基造成的损伤卵母细胞,会对卵子产生有利影响。

有研究显示,白藜芦醇可以增加卵泡的保护作用,对于自然老化,或者是因肥胖或多囊卵巢综合症导致不孕的患者,适当的补充白藜芦醇对于备孕,下面可以详细了解一下白藜芦醇的作用:

1.白藜芦醇可以改善与年龄相关的卵巢功能衰退,试管期间补充白藜芦醇可抑制卵泡闭锁的过程,增加卵巢卵泡储备,延长卵巢寿命,并改善了卵母细胞的数量和质量;

2.在子宫内膜中,白藜芦醇的抗细胞凋亡和抗增殖作用抑制异位子宫内膜的进展,对抗子宫内膜异位症,白藜芦醇降低了血管内皮生长因子的表达,改善了卵巢过度刺激综合征和子宫内膜异位症的治疗;

3.白藜芦醇有可能通过其抗氧化作用和刺激线粒体生物发生,使卵巢储备和功能下降的女性受益。

在一些微生物实验室或者需要无菌操作的场所,想了解灭菌的具体效果就需要生物指示物的帮助。通常灭菌指的是用物理或化学的方式将目标微生物全部杀灭,使之达到无菌保障水平,一般最常用的有化学试剂、射线、湿热、干热以及过滤等除菌手段。针对不同的微生物采用的方法也不一样。而想要验证这些方法的效果,就需要一些具有灭菌耐受力的活微生物作为指示物来进行判断。

今天我们要讲的枯草芽孢杆菌黑色变种主要用于各类医疗机构及制药工业领域的消毒效果验证中,其原理是经过灭菌处置后含有枯草芽孢杆菌黑色变种的水样在通过孔径为0.45um的滤膜后,细菌和芽孢被截留在滤膜上,然后将滤膜置于酪氨酸琼脂培养基上,36℃±1℃培养72h-96h,枯草芽孢杆菌黑色变种产生的酪氨酸酶可分解并利用酪氨酸形成黑色素,产生黑色的特征菌落。对特征菌落进行染色镜检后通过生化试验做进一步鉴定,能利用甘油和甘露糖,可还原硝酸盐和水解淀粉,不能利用苦杏仁苷和甘露醇,并确认为革兰氏阳性芽孢杆菌的特征菌落为枯草芽孢杆菌黑色变种,鉴定结果为阳性。

检测所用试剂>

1.酪氨酸琼脂培养基。

2.营养琼脂培养基。

3.淀粉培养基和碘液。

4.硝酸盐还原培养基和相关试剂。

5.甘油复红肉汤培养基。

6.甘露糖生化培养基。

7.甘露醇生化培养基。

8.苦杏仁苷生化培养基。

9.革兰氏染色液。

10.芽孢染色液。

11.阴性对照菌:如地衣芽孢杆菌。

12.阳性对照菌:枯草芽孢杆菌黑色变种。

13.枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢悬液

按照《消毒技术规范》的规定制备,也可购买浓度范围在106CFU/ml-109CFU/ml之间的市售枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢悬液。

14.无菌滤膜:直径50mm,孔径0.45μm的醋酸纤维滤膜。

按无菌操作要求包扎,经121℃高压蒸汽灭菌20min,晾干备用;或将滤膜放入烧杯中,加入实验用水,煮沸灭菌3次,15min/次,前2次煮沸后需换水洗涤2-3次。也可采用市售的无菌滤膜。

15.石蜡质封口膜。

16.无菌水:取适量实验级纯水,经121 ℃高压蒸汽灭菌20 min,备用。

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检测所需试剂>

1.样品瓶:螺口带盖或磨口具塞的250ml、500ml广口玻璃瓶。

2.恒温培养箱:36℃±1℃。

3.高压蒸汽灭菌器:121℃,可调。

4.pH计:准确到0.1pH单位或更高精度。也可使用pH精密试纸。

5.显微镜:物镜4×或5×、10×、20×、40×,油镜100×,目镜10×或15×。

6.分析天平:实际分度值0.0001g。

7.培养皿:直径90mm。

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8.过滤装置:配有砂芯滤器、圆筒形玻璃漏斗和真空泵,抽滤压力不低于-50kPa。

9.接种环:直径1mm-3mm。

10.镊子:不锈钢或一次性无菌塑料镊子。

11.刻度移液管:1ml、10ml。也可使用可调式移液器。

12.量筒:100ml。

13.锥形瓶:100ml。

14.酒精灯。

15.试管:10ml。

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16.无菌操作设备:无菌室、超净工作台、生物安全柜。

17.一般实验室常用仪器和设备。

水样采集>

评价使用高温高压灭菌设备的灭菌效果时,取样品瓶,加入枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢悬液及200ml无菌水使混合液中枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢终浓度达到5×104CFU/ml-5×105CFU/ml。灭菌处置完毕后,取出样品瓶,对水样进行灭菌生物指示物(枯草芽孢杆菌黑色变种)的检测。

评价使用其它灭菌设备的灭菌效果时,灭菌前取适量枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢悬液加入灭菌设备,使水样中枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢终浓度达到5×104CFU/ml-5×105CFU/ml。灭菌处置完毕后,从灭菌设备中采集水样,进行灭菌生物指示物(枯草芽孢杆菌黑色变种)的检测。采样量一般为样品瓶容量的80%左右,不得用样品洗涤样品瓶。样品采集完毕后,迅速用无菌包装纸包扎样品瓶。

样品采集后宜在2h内检测,否则应在10℃以下冷藏保存运输,但不得超过6h。实验室接收样品后,不能立即开展检测的,样品应在4℃以下冷藏保存,并在2h内检测。

水样过滤>

用无菌镊子以无菌操作夹取无菌滤膜贴放在已灭菌的过滤装置上,固定好过滤装置。将样品充分混匀后取100 ml 抽滤,以无菌水冲洗滤器内壁2-3 次。样品过滤完成后,再抽气约5s,关上开关。过滤前按照无菌操作要求调节样品的pH值至7.0-8.0。

培养流程>

用灭菌镊子夹取滤膜移放在酪氨酸琼脂培养基上,滤膜截留细菌面向上,滤膜应与培养基完全贴紧,两者间不得留有气泡,然后用石蜡质封口膜封好培养皿,倒置培养皿,放入恒温培养箱内,36℃±1℃培养72h-96h。

培养96h后,如培养基上未有菌落生长,则试验终止;如培养基上有菌落生长,则挑取黑色的特征菌落于营养琼脂培养基上,36℃±1℃培养24h,待鉴定。同时将已挑菌落的酪氨酸琼脂培养基培养皿储存于2℃-5℃,以备必要时复查。

染色镜检>

挑取黑色或可疑菌落,分别使用革兰氏染色液和芽孢染色液染色,枯草芽孢杆菌黑色变种革兰氏染色镜检以及芽孢染色镜检可以参考相关镜检图,枯草芽孢杆菌黑色变种为革兰氏阳性菌,营养细胞呈杆状,单个或呈短链状排列。

生化实验>

挑取黑色或可疑菌落,分别接种到淀粉培养基、硝酸盐还原培养基、甘油复红肉汤培养基、甘露糖生化培养基、甘露醇生化培养基和苦杏仁苷生化培养基上。

空白对照实验>

用无菌水按照过滤和培养步骤进行操作;培养96h后平板培养基上应无菌落生长,否则,该次样品鉴定结果无效,应查明原因后重新采样和检测。

阴性及阳性对照>

将阴性对照菌和阳性对照菌制成浓度为40CFU/L-600CFU/L的菌悬液,分别按照过滤、培养、实验的步骤操作。阴性、阳性对照菌呈现的生化反应结果应与参照表所列结果一致,否则该次水样鉴定结果无效,此时查明原因后重新采样和检测。

结果判断>

100ml水样中检出枯草芽孢杆菌黑色变种,即可断定灭菌不合格;而如果在100mL水样中未检出枯草芽孢杆菌黑色变种,可评价为灭菌合格。

第三代试管婴儿技术是中国最先进的试管婴儿技术。虽然它仍然是一种辅助生殖技术,但在第一代和第二代试管的基础上增加了胚胎筛查的过程,可以大大避免携带不良因素的胚胎,并有效地移植高质量的胚胎。那么三代试管包生男孩最新费用多少呢?附国内包生男孩试管医院推荐。

2022三代试管包生男孩最新费用:

2022三代试管包生男孩费用在5~12万元之间,虽然第三代试管婴儿技术具有筛选性别的能力,但在我国法律层面上筛选胎儿的性别是非法的。只有符合医学指征的患者才能做试管选性别,以下是费用详细介绍。

1、检查费用

在做试管之前,常规体检是必不可少的。在男性生殖器官的医学检查中,部分检查项目可由员工医疗保险卡支付。第三代试管周期前的检查费用在5000-8000元之间。

2、药物费用

医疗费用涉及促排卵和卵泡期的中后期应用。促排卵是通过促排卵药物刺激子宫和卵巢,使多个卵泡一起生长发育。不同的促排卵方案会使用不同的药物剂量,进口药和国产药差别很大。同时,目前国内只有部分促排卵药可以报销,所有促排周期的费用在3000-1.5万元之间。

3、胚胎筛查费用

第三代试管婴儿技术将涉及染色体检查的费用。这个费用是由所选胚胎的总数决定,胚胎数量越多,费用就越高。目前的费用是每个胚胎3750元。此外,单基因疾病的诊断技术对第三代试管技术至关重要,每个胚胎的费用为5050元。

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4、手术费用

手术治疗费用可从试管婴儿取卵到胚胎移植,其中一次阴道穿刺试管婴儿取卵2400元,一次胚胎移植2300元。

5、别的费用

医院挂号费、检验费、精液筛选费、胚胎组织学评定、胚胎穿刺活检等。

国内包生男孩试管医院推荐:

1、北京大学第三医院

医院性质:公立三甲医院

相关技术:夫精/供精人工授精助孕技术,第一、二、三代试管助孕技术;

是否包生男孩:不接受无条件包生男孩。

2、华中科技大学同济医学院附属同济医院

医院性质:公立三甲医院

相关技术:夫精/供精人工授精助孕技术,第一、二、三代试管助孕技术;

是否包生男孩:不接受无条件包生男孩。

3、中信湘雅生殖遗传医院

医院性质:公立三甲医院

相关技术:夫精/供精人工授精助孕技术,第一、二、三代试管助孕技术;

是否包生男孩:不接受无条件包生男孩。

4、南京鼓楼医院

医院性质:公立三甲医院

相关技术:夫精/供精人工授精助孕技术,第一、二、三代试管助孕技术;

是否包生男孩:不接受无条件包生男孩。

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